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新手必看:手性色譜分析的 3 個核心誤區(附 Daicel 柱使用建議)

更新時間:2025-12-03點擊次數:142

手性色譜分析是藥物研發、天然產物檢測的關鍵環節,新手常因對原理和柱型特性不熟悉踩坑,導致分離失敗或柱效快速下降。

大賽璐授權代理商——廣州綠百草 結合 Daicel(大賽璐)手性柱(如 AD-H、OD-H、CR (+) 等)的使用場景,梳理 3 個核心誤區及解決方案,助力高效上手。

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誤區 1:盲目選型,忽略化合物與柱型匹配

新手易憑 “熱門型號” 選型(如跟風用 AD-H),卻忽略目標化合物結構特性 —— 比如用 AD-H 拆分堿性生物堿,分離度差且峰形拖尾,實則 OD-H 更適配。

Daicel 柱使用建議:

含芳香環、中性 / 酸性化合物→選  CHIRALPAK® AD-H 手性柱(正相)、CHIRALCEL OJ-RH 手性柱(反相);

堿性化合物(胺類、生物堿)→優先 CHIRALCEL OD-H(正相)、CHIRALCEL OD-RH(反相),可加 0.1% 二乙胺抑制吸附;

氨基酸 / 銨鹽類→專屬 CROWNPAK CR (+) 手性柱;生物樣本→ CHIRALPAK AGP 手性柱(蛋白質鍵合型,生物相容性好)。


誤區 2:流動相 / 添加劑使用 “一刀切”

常見錯誤:

① 用多糖涂敷型( CHIRALPAK® AD-H CHIRALCEL OD-H)時加丙酮、氯仿等強極性溶劑,導致固定相脫落;② 給 CROWNPAK CR (+)  手性柱用含鉀鹽的流動相,破壞冠醚識別位點;③ 隨意添加高濃度酸堿,超出柱 pH 耐受范圍。


正確操作——

溶劑兼容性:Daicel 多糖涂敷型禁用丙酮、氯仿;AGP 禁用乙醇(會導致蛋白質變性);

添加劑匹配:酸性樣品加 0.1%  三氟乙酸(TFA),堿性樣品加 0.1% 二乙胺(DEA),CR (+) 柱禁用鉀鹽;

pH 控制:OD-RH、OJ-RH 等反相柱 pH 需在 2.0~9.0,AGP 柱 pH 4.0~7.0。


誤區 3:忽視柱維護,用完直接存放

新手常做完實驗不沖洗,或用錯保存溶劑(如 AD-H 用純水保存),導致殘留樣品吸附、固定相損壞,柱效快速下降。Daicel 柱維護要點:

實驗后沖洗:正相柱(AD-H、OD-H)用正己烷 / 異丙醇(90:10)沖 30 分鐘;反相柱(OD-RH)用水 / 乙腈(60:40)除鹽后再平衡;

保存溶劑:AD-H/OD-H 用正己烷 / 異丙醇(90:10),AGP 用緩沖液(pH 7.0),CR (+) 用 0.1% 高氯酸水溶液;

禁忌:避免長期高溫(多糖涂敷型≤40℃)、頻繁反接柱子,柱效下降時用專屬溶劑沖洗(如 AD-H 用 100% 乙醇)。

 

遵循 “選型匹配結構 + 流動相適配柱型 + 規范維護” 原則,可大幅降低實驗失敗率,同時延長 Daicel 手性柱使用壽命,快速掌握手性色譜分析核心技巧。

 

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